小鼠体液采集
一、血液采集
（一） 尾静脉采血
器材：小鼠固定器、手术刀片、三棱针、取血管、干棉球
操作步骤：
1． 将小鼠放在固定器内，漏出尾巴，拉直尾部并使其低于身体；
2． 由尾根至尾尖方向轻轻推挤使尾静脉充盈；
3． 翻转鼠尾使一侧静脉向上，用左手拇指和食指固定鼠尾；
用手术刀片在食指托起处垂直于尾部迅速切一个小口，割破尾静脉；（或以三棱针在食指托起处垂直刺破尾静脉）
4． 如果出血不多，可以切口近心端稍微按摩，待血液涌出至足够大的一滴后用吸管采集；
5． 采血后，用干棉球按压切口并抬高尾部止血。
注意事项：
1． 初次采血应从尾下1/3开始；
2． 反复采血时，由尾尖向尾根依次操作，两根尾静脉交替使用；
3． 适当升高室温至25~28度利于采血；
6． 参考采血量：0.03~0.05ml；
7． 若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。
（二） 眶静脉采血
器材：乙醚、毛细玻管（前端内径0.5~1.0mm，处理成锐利斜口）、干棉球及取血管。
操作步骤：
1． 侧眼向上固定小鼠，用乙醚浅麻醉；
2． 左手拇指、食指和中指在小鼠颈部两侧轻轻施压，使头部充血，眼球突出；
3． 右手持毛细玻管，斜面背向眼球，由小鼠内眼角垂直刺入眼球和眼睑之间；
4． 进入2~3mm左右，感到有阻力时，稍稍拈转玻管，后退吸引，血液由于 血压的作用进入玻管；
5． 采集到足够血液后，放松左手对颈部的压力，同时抽出采血管；
6． 用干棉球按压小鼠眼部约30s止血。
注意事项：
1． 反复采血时两眼交替使用；
2． 每次采血后，间隔3~7d，让小鼠眼部修复，故此方便不适用于需要经常采血的实验；
3． 参考采血量：20~30g小鼠可采0.2~0.3ml血液，若动物无需存活，可采血0.7~1ml只。
（三） 心脏采血
器材：小鼠解剖固定板、2~5ml注射器、4~5号针头、75%酒精棉球及乙醚
操作步骤：
1． 将小鼠用乙醚麻醉，腹面向上，固定于板上；
2． 用左手食指在左心区触摸心搏最明显的部位，一般位于两前肢和剑突形成的三角形右下方，左胸第4、5肋骨间；
3． 左手拇指和食指在右胸腔处加压顶住心脏，右手持注射器从心搏最强处垂直刺入；
4． 见到血液进入针头即放开左手，稳住注射器缓慢抽吸；
5． 如无须动物存活，也可打开胸腔直接对心脏采血。
注意事项：
1． 控制针头刺入浓度，一般刺入胸腔即可，过深则刺穿心脏，刺入肺部；
2． 如刺入后针头无回血，应缓慢退针，且边退边抽，直到完全退出，仍无回血后重新穿刺，不可以在胸腔内用针头试探；
3． 采血应缓慢，避免心脏塌陷；
4． 参考采血量：若无需动物存活，可采血0.8~1.2ml。
（四） 大血管采血
器材：乙醚、眼科剪、解剖镊、1~2ml注射器、4号针头、75%酒精棉球及解剖固定板。
操作步骤：
1． 劲动（静）脉采血：将小鼠麻醉，仰卧于固定板，剪去一侧劲部外侧被毛；分离颈静脉或劲动脉，用注射器取所需血量。
2． 股动（静）脉采血：将小鼠麻醉，仰卧于固定板，剪开腹股沟处皮肤，暴露股静脉，或股动脉，用注射器抽取所需血量。
（五） 断头采血
器材：剪刀及烧杯
操作步骤：
1． 用左手拇指和食指捏住小鼠肩胛部位，将小鼠头向下固定；
2． 右手持剪刀垂直快速将小鼠颈部血管剪断（可将头部剪去）；
3． 将小鼠身体倒置，收集血液。
二、尿液采集
（一） 代谢笼法
器材：小鼠代谢笼
操作步骤：
1． 选择合适的代谢笼，在集尿器下方尿液出口放置收集尿液的容器；
2． 将饮料和饮水加入代谢笼，将小鼠放入代谢笼，根据实验要求收集排出尿液；
3． 可利用代谢笼的粪尿分离功能，收集小鼠粪便。
（二） 徒手法
器材：小试管或平皿
操作步骤：
1． 徒手固定小鼠；
2． 将小鼠头尾同时向背侧弯曲，并项住腰骶部，使其腹部向前微突；
3． 收集小鼠反向性排出的尿液；
4． 如无排尿，可用另一手食指轻压膀胱所在部位体表，适当按摩迫使其排尿。
 
三、腹腔液采集
器材：乙醚、5ml注射器、9号针头、小鼠解剖固定板及75%酒精棉球。
操作步骤：
1． 将小鼠用乙醚麻醉，仰卧固定，腹部剃毛消毒，擦干；
2． 用无菌血管钳提起皮肤，由腹腔下部刺入注射器，分别从3个方向注入无菌生理盐水或培养液；
3． 将固定板竖起，使小鼠头部向 上；
4． 在小鼠下腹部刺入注射器，用无菌血管钳固定针头后拔去注射器，收集由针头流出的洗液。
四、腹水采集
器材：乙醚、2~5ml注射器、9号针头、小鼠解剖固定板及75%酒精棉球。
操作步骤：
1． 将小鼠用乙醚麻醉或颈椎脱臼处死，仰卧固定，使小鼠头部高于尾部。腹股沟和腹中线之间的穿刺部位消毒；
2． 穿刺针垂直刺入，针尖有落空感时，表明进入腹腔；
3． 若腹压不高，则腹壁不够紧张，需用手指绷紧皮肤，或用钳子提起皮肤，以方便穿刺针进入；
4． 腹水可从穿刺针自然流出，量少时，可用注射器抽取。
注意事项：
腹水量大，应缓慢间歇抽取。当针尖贴住腹壁或肠道时，腹水流出受阻，应旋转针头或稍退，以调整针头的位置。
五、胸水采集
器材：乙醚、5ml注射器、9号针头、小鼠解剖固定板及75%酒精棉球。
操作步骤：
1． 将小鼠麻醉，侧卧固定，脊侧腑后线胸壁第11~12根肋间隙去毛，消毒；
2． 操作者左手拇指和食指绷紧穿刺部位皮肤，将穿刺针沿肋骨前缘垂直刺入；
3． 针尖通过肋间肌后，阻力消失有落空感，缓缓抽取胸水；
4． 如果实验不要求动物继续存活，可处死动物剖胸，直接吸取胸水。
注意事项：
1． 操作过程严防空气进入胸腔，始终保持胸腔负压。
2． 穿刺时，应控制针头的深度，防止穿刺过深，刺伤肺脏。
六、骨髓采集
（一） 挤压法
器材：小鼠解剖固定板、止血钳、眼科剪、医用纱布及75%酒精。
操作步骤：
1． 将小鼠颈椎脱臼处死，仰卧固定，胸部体表消毒；
2． 切开皮肤，暴露胸骨，取出胸骨；
3． 用纱布和剪刀除去骨表面附着的组织和血液；
4． 剪去胸骨的另一端，用止血钳夹住另一端，销加压挤出骨髓。
（二） 离心法
器材：眼科剪、眼科镊、1ml注射器、4号针头、医用纱布、小牛血清、1.5ml离心管、细长滴管及小鼠解剖固定板。
操作步骤：
1． 用注射器吸取适量小牛血清（冲洗一身股骨一般需0.2ml），备用；
2． 将小鼠颈椎脱臼处死，仰卧固定，沿腹股沟切开皮肤；
3． 分离股骨周围的肌肉，离断股骨两头的韧带，取出股骨；
4． 用纱布剔除股骨上附着的组织，擦净血液，剪去股骨两头，露出骨髓腔；
5． 用镊子夹住股骨中央，置于1.5ml离心管上方，股骨一端开口正对离心管口；
6． 将注射针头插入股骨骨髓腔，推出少许小牛血清；
7． 用针头上下捣碎骨髓，同时逐渐推出全部小牛血清；
8． 用离心管收集骨髓和小牛血清的混合物，用细长滴管伸入离心管底部吹打，使骨髓充分分散；
9． 将离心管口封闭，离心后，弃上清，取沉淀物。
注意事项：
1． 从动物处死到骨髓采出时间，应控制在10min内；
2． 剪去股骨两头时，充分暴露骨髓腔，若剪不完全，则股骨两头不通，骨髓无法冲下来，另外注意不要剪裂股骨。
七、精液采集
（一） 电刺激采精法
器材：小鼠解剖固定板、电极及电源
操作步骤：
1． 将雄性小鼠呈站立，或卧位固定；
2． 剪去包皮周围的被毛，并用生理盐水冲洗，拭干；
3． 将电极棒插入直肠，靠近输精管壶腹部的直肠底壁，插入深度约1~2cm；
4． 选择频率，开通电源，调节电压由低到高，至小鼠勃起射精，收集精液；
5． 电刺激参数：频率20-30Hz，电压3-12V，电流4-20mA,持续时间1-3s/次，间隔2-5s。
（二） 附睾内采精法
器材：眼科剪及灭菌滤纸
操作步骤：
1． 颈椎脱臼法处死小鼠，迅速摘出睾丸和附睾；
2． 在灭菌滤纸上，除去睾丸和附睾的血液和脂肪组织；
3． 用眼科剪剪开附睾尾部，取出精子团（也可穿刺吸取）。
（三） 阴道栓涂片法
雌雄小鼠交配后，24h内可在雌性小鼠阴道口出现白色透明的阴道栓，取阴道栓涂片，获得凝固精液。
八、阴道脱落细胞采集
（一） 冲洗法
器材：细长玻璃管及生理盐水
操作步骤：
1． 徒手背式，或腹式固定小鼠；
2． 用滴管吸取少量生理盐水，将滴管前端探入小鼠阴道，轻按滴管橡皮头，将生理盐水打入阴道，再吸出；
3． 反复冲洗2-3次后将冲洗液全部吸出
注意事项：
1．固定小鼠一定要抓牢，动作要轻，避免激怒小鼠，引起挣扎，损伤小鼠阴道。
（二） 蘸取法
器材：大小合适的棉拭子及生理盐水
操作步骤：
1． 徒手背式或腹式固定小鼠，将棉拭子用生理盐水湿润，挤去多余水分；
2． 一手持棉拭子探入小鼠阴道；
3． 略微拈转棉拭子，使之蘸染阴道内液，缓慢退出棉拭子。
 
脏器采集
说明：脏器采集方法适用于已经死亡的小鼠或活小鼠，若需要检测时小鼠依然存活需采用适当方法将小鼠处死，以下方法没有将小鼠处死的步骤写入。
一、体表检查
1、 称体重；
2、 若小鼠死亡，则需检查尸冷、尸僵、或腐败情况，判断大致死亡时间；
3、 检查体况：肥胖、正常、消瘦、肢体各部分比例；
4、 检查被毛：有无光泽，有无污损，是否整齐；
5、 检查皮肤：有无斑、疹、出血和皮肤损害；
6、 检查眼耳口鼻，包括黏膜有无病变，或分泌物残留；
7、 检测肛门和生殖器官，包括有无腹泻，病变情况。
二、皮下组织检查
1． 将小鼠在75%酒精中浸泡消毒全身后，固定于解剖板上；
2． 提起外生殖道上部皮肤，用剪刀切一小口，由此切口，沿腹中线向下颌剪开皮肤；
3． 观察皮下组织的出血和感染情况。
三、腹腔检查及主要脏器采取
1． 沿腹正中线和肋骨下缘剪开腹壁，在耻骨联合处向两后肢方向分别剪开，完全打开腹腔；
2． 打开腹腔时注意观察：有无积液、血液或炎性渗出物，检查其性状和液体量；
3． 检查腹腔内各脏器位置，特别注意肝、脾位置和大小，膀胱和胃的充盈状况，大网膜和腹膜颜色与状态等；
4． 腹腔脏器联合取出：由横膈处切断食管，由骨盆腔切断直肠，沿后壁从上向下，剪除筋膜韧带组织，将食管和直肠，将肝、胆、脾、胃、肠、胰腺整体取出；
5． 腹腔脏器依次取出次序：脾脏、胰腺、胃、肠、肾、肾上腺、肝、胆囊和泌尿生殖器官。
1） 脾脏：用镊子提着胃壁，翻出胃左侧的脾脏；轻轻夹起脾脏，切断脾门部血管将其采出。
2） 胰脏：用解剖镊拉出十二指肠，展开，在肠系膜上找到肉色的胰腺；沿十二指肠分离胰腺，取出；将采出的胰腺投入10%甲醛溶液，胰腺经固定变成灰白色质地硬化，脂肪组织无变化，据此将胰腺与周围的脂肪组织分离。
3） 胃肠：在食道与贲门部用丝线作双道结扎，切断食道；提起胃贲门部，依次切断周围韧带，游离胃；提取胃，从幽门沿肠壁，顺序切断肠系膜，游离全部肠道，将胃肠从腹腔内一起采出。
4） 肾脏和肾上腺：在腹后壁找到肾脏，肾上腺位于肾脏上方，埋于脂肪中；用眼科弯镊夹住肾上腺底部的血管和组织，分离出肾上腺并采出；用镊子剥离肾脏周围的脂肪组织；用镊子夹住肾门组织，剪取肾脏，剥去肾包膜。
5） 肝脏和胆囊：切断肝脏周围的血管和韧带，游离肝脏，用镊子夹住门静脉根部，将肝脏和胆囊一并采出；用镊子夹起胆囊，用剪刀小心分离胆囊和肝组织，取下胆囊。
6） 雌性小鼠生殖器官：在小鼠下腹部找到子宫的Y形分支处，用止血钳在子宫颈口夹住（或用缝线结扎）；提起子宫颈，向下分离至阴道开口，作环形切口；沿子宫分支，用眼科剪向上分离子宫至卵巢；用镊子小心剥离卵巢周围的脂肪，分离出卵巢，完整取出卵巢、子宫和阴道。
7） 雄性小鼠生殖器官的采出：将睾丸从阴囊推移至腹腔内，剪取睾丸。
四、胸腔检查及主要脏器采取
1． 打开胸腔，提起胸骨剑突，沿肋骨下缘切开横隔；
2． 剪断肋骨和肋软骨连接处，将胸骨向头部翻起或完全取下，暴露胸腔；
3． 检查胸腔内各器官位置，形态和相互关系；
1） 胸腺：打开小鼠胸腔，将胸骨向小鼠头部翻越，露出贴于胸骨柄 下的胸腺；用眼科镊分离胸腺；将眼科镊伸入胸腺下方，平稳端出胸腺。
2） 心脏：用镊子夹起心脏主动脉根部，逐一切断心脏周围的各血管，取出心脏。
3） 肺脏：用镊子夹住气管末端，提起气管将肺脏向下拉，另一手持眼科剪，依次分离肺脏和胸壁，将气管和肺一周取下。
五、颅腔检查及脑采取
1． 从动物头顶部正中线切开皮肤，前至鼻尖，后至颈部，将皮肤和皮下组织向两侧拉开暴露颅骨顶部；
2． 剥离附着在头颅和颈部脊柱上的肌肉，沿枯骨和顶间骨闭合处切开颅骨，剪除顶骨，暴露脑部；
3． 将眼科镊插入脑与颅骨的间隙分离脑组织，并切断延髓；
4． 一手持解剖镊支起小鼠头部，鼻尖向下，另一手持眼科镊仔细分离脑组织，使其从颅腔中脱出；
5． 切断视神经，用眼科镊将整个脑组织端出。